期刊简介
本刊是我国核医学领域的权威性和专科性杂志,全面反映我国医用核仪器、核试剂的研制,实验核医学研究,临床核医学方法的建立与提高,体外分析方法的创新和推广等,及时报道我国核医学临床科研工作的重大进展,促进国内外核医学学术交流。2007年中华医学会与万方数据携手推动医药信息服务,该刊电子版已独家授权万方数据来实现其数字化服务推广。
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首页>中华核医学与分子影像杂志

- 杂志名称:中华核医学与分子影像杂志
- 主管单位:中国科学技术协会
- 主办单位:中华医学会
- 国际刊号:2095-2848
- 国内刊号:32-1828/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:国家“双效”期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中)
99Tcm-octreotide体外受体结合法及其结合特性研究
武鸿文;管昌田
关键词:体外受体, 结合法, 细胞膜, 受体结合, 结合反应, 放射性计数, 实验, 放射受体分析, 标记肽, 特异性结合, 试管, 膜受体, 滤膜, 竞争抑制, 结合特性, 结合活性, 方法, 反应条件, 测定, 变异系数
摘要:直接标记法制备99Tcm-octreotide 已获得成功[1],但标记过程的化学处理有可能影响受体结合特性,因此,笔者进行了体外细胞膜放射受体分析研究,以便为临床受体显像提供实验依据。 一、材料与方法 1.膜受体结合方法学研究。99Tcm-octreotide纯化后放化纯为93.8%,放射性比活度649 TBq/mol[1],采用Wistar大鼠脑皮质细胞膜进行体外受体结合分析,其制备方法参照文献[2],有改进。细胞膜蛋白质质量浓度为0.32 g/L。按照体外放射受体分析的一般流程,首先进行大结合活性测定,取定量99Tcm-octreotide 5×10-7 mol/L,细胞膜量逐级增加,直到过量,进行结合反应,以滤膜放射性总结合TB(放射性计数)与加入99 Tcm-octreotide量T(放射性计数)的比值得大结合率,即为99Tcm-octreotide的大结合活性。其次以大结合率为标准,分别改变反应体系中温度、保温时间、细胞膜和标记肽用量、分离条件等相关因素,按照受体分析流程进行分离和测定,以确定细胞膜受体结合反应的佳条件。后通过观察同一细胞膜在同一次结合实验中的变异系数CV1(n=5组)和同一细胞膜在不同天进行结合实验的变异系数CV2(n=5次),研究佳结合反应条件的可重复性。非特异性结合(NSB)包括细胞膜组织本身的NSB(采用竞争抑制曲线法)和实验材料(滤膜、试管等)的NSB。 2.受体结合特性研究。①饱和实验:TB组测定,在系列试管中依次加入细胞膜60 μL,标记肽(1~10)×10-7 mol/L,级差1×10-7 mol/L。NSB组测定,在系列试管中除上述试剂外,每管还须加入octreotide 2 μg,使细胞膜受体特异性结合受到充分抑制。两组试管均用含0.5% BSA Tris缓冲液补足至200 μL,25 ℃保温90 min,快速通过滤膜终止结合反应,测滤膜放射性即为TB或NSB,后求得亲和常数KD和受体大结合容量Bmax。②竞争抑制实验:在系列试管中依次加入细胞膜60 μL,标记肽5×10-7 mol/L, 非标记肽量10-12~10-5mol/L,级差10-1 mol/L,在相同反应条件下结合并终止反应。③对照物99Tcm-oxytocin体外结合实验:参照上述方法进行。
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